Что такое ифа анализ

Загадочный помощник – ИФА

Наверняка, Вы неоднократно сталкивались с этой загадочной аббревиатурой — ИФА. Давайте разберемся с тем, что это за метод, какова специфика проведения анализа, в каких случаях оправдано его назначение и в чем могут помочь его результаты.

Что такое иммуноферментный анализ (ИФА)?

На сегодняшний день среди иммунологических методов диагностики лидирующее положение занимает иммуноферментный анализ – ИФА. Иммуноферментный анализ (ИФА) это лабораторное исследование, которое основано на реакции “антиген-антитело”, а точнее — на высокой избирательности и специфичности иммунологических реакций. Суть этого лабораторного метода — определение специфических антител с помощью специальных биохимических реакций, которые помогают определить не только присутствие или отсутствие антител, но и их количество.
агодаря проведению анализа, можно определить уровень гормонов, иммуноглобулинов, иммунологических комплексов и других биологически активных веществ. Для исследования на антитела может использоваться кровь, спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и т.д. Метод ИФА является одним из наиболее активно развивающихся направлений лабораторной диагностики. Высокая стабильность реагентов, простота способов регистрации и многие другие достоинства метода ИФА способствовали его широкому внедрению в различные области медицины, сельского хозяйства, биологической промышленности, а также в многочисленные научные исследования. Как любой метод лабораторный диагностики, ИФА имеет свои достоинства и недостатки. К достоинствам ИФА можно отнести высокую чувствительность (90%), специфичность (95%), достаточно простую воспроизводимость, унифицированность и пригодность для массовых обследований. Также к его преимуществам можно отнести возможность выявлять наличие инфекции любой локализации и проследить в динамике ход заболевания, возможность инструментально оценить результаты анализа, что устраняет фактор субъективности. К недостаткам метода, прежде всего, относится то, что он является непрямым, то есть определяется не возбудитель, а иммунный ответ на него, который может иметь индивидуальные вариации.

Каков механизм реакции?

Иммуноферментный анализ (ИФА) основан на обнаружении антигенов возбудителя или антител к ним в патологическом материале или сыворотке крови.
еди различных модификаций ИФА, в настоящее время, наибольшее распространение получили конкурентный метод, который применяется в анализе гормонов, и метод двойного связывания, который активно используется в серодиагностике инфекций. В основе иммуноферментного анализа лежит иммунная реакция антигена с антителом, а присоединение к антителам ферментной метки позволяет учитывать результат реакции антиген-антитело по появлению ферментативной активности или по изменению уровня этой активности. Необходимо отметить, что для каждой тест-системы есть свои показатели учета результатов, поэтому при оценке результатов необходимо ориентироваться на показатели нормы и патологии конкретной тест-системы, применявшейся для исследования.

Что можно выявить методом ИФА?

Метод иммуноферментного анализа используется для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций и для определения наличия антител классов (IgA, IgM, IgG) к антигенам различных возбудителей (вирусные гепатиты, ВИЧ, сифилис, TORCH, хламидиозы, паразиты). С помощью ИФА можно определить антитела к любой инфекции, при условии, конечно, что организм их выработал. Этот метод позволяет различать острые и хронические формы заболеваний, выделять стадию заболеваний и выявлять практически здоровых носителей. Необходимо заметить, что наличие антител в сыворотке крови или в патологическом материале может свидетельствовать лишь о контакте организма с возбудителем в настоящее время или в прошлом.

Каковы закономерности иммунологического ответа?


Человеческий организм вырабатывает антитела (иммуноглобулины) пяти типов, но клиническое значение имеют только три из них: IgA, IgM , IgG. IgA — основной иммуноглобулин, выделяемый слизистыми оболочками, играет барьерную роль. IgM — первый иммуноглобулин, отвечающий на внедрение инфекции и являющийся маркером остроты процесса. IgG — основной иммуноглобулин в сыворотке крови, который служит для долговременной защиты от инфекций. Аутоантитела тоже относятся к классу IgG. Итак, организм встретился с инфекционным агентом, либо начался аутоиммунный процесс. С момента внедрения микроорганизма в человеческий организм и до момента появления антител в сыворотке крови проходит определенный период времени, так называемый серонегативный период. Для различных инфекций и отдельных людей он может быть неодинаков. По прошествии этого периода, первыми начинают вырабатываться IgM, пик их концентрации приходится на период максимальных проявлений клинических признаков острой инфекции. Именно поэтому IgM принято считать маркером острой фазы заболевания. Специфические IgM начинают выявляться с 1-2 недели после заражения, их титр постепенно нарастает и достигает максимальных значений к концу первого месяца, затем снижается. В последующем содержание IgM в сыворотке крови снижается. В 70% случаев антитела класса М циркулируют до 3 месяцев после заражения, в 10% случаев — больше года. Через определенное время после появления IgM, которое для каждой инфекции свое, начинают вырабатываться IgA A — антитела, основная часть которых концентрируется на слизистых оболочках, где реализуется их защитная функция.
отставанием на 1-2 недели начинает увеличиваться титр IgG. Этот период соответствует стадии перехода инфекции из острой в хроническую фазу. Специфические IgG начинают определяться со 2 недели, их содержание достигает максимальных величин через 1-2 месяца, затем волнообразно снижается, но сохраняется пожизненно. Обнаружение IgG не имеет самостоятельного значения, однако свидетельствует об инфицированности человека и наличии в его организме возбудителя в неактивном состоянии. Если в какой-то момент происходит обострение хронической инфекции, то наблюдается новый всплеск IgM с последующим увеличением титра IgG, соответствующим фазе затихания заболевания. Если организм справляется с инфекцией (сам или с помощью медикаментов), то IgG могут еще длительное время (а для некоторых инфекций и пожизненно) оставаться повышенными. Для кори, дифтерии, паротита и других инфекций наличие специфических иммуноглобулинов является надежным барьером против повторного инфицирования. К сожалению, это не относится к урогенитальным инфекциям, иммунитет против которых не развивается. Таким образом, в зависимости от давности заражения и характера иммунного ответа в ходе инфекционного процесса могут обнаруживаться различные количества антител различных классов.

Что такое авидность?

Авидность — это характеристика, которая свидетельствует о прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами.
у характеристику обычно используют по отношению к IgG, которые обладают низкой авидностью, то есть достаточно слабо связывают антиген, в начале заболевания и некоторое время после выздоровления. Низкоавидные IgG-антитела, в среднем, выявляются в течение 3-5 месяцев от начала инфекции, но иногда вырабатываются и в течение более длительного срока. Само по себе выявление низкоавидных IgG-антител не является безусловным подтверждением факта свежего инфицирования, но служит дополнительным подтверждающим свидетельством в ряду остальных серологических тестов. Затем развитие иммунного процесса постепенно идет в сторону синтеза лимфоцитами высокоавидных IgG-антител, которые более прочно связываются с соответствующими антигенами. Высокая авидность IgG позволяет исключить недавнее первичное инфицирование. При реактивации инфекции выявляются специфические IgG высокой авидности. Определение авидности дает дополнительную информацию, полезную в диагностическом и прогностическом плане при подозрении на различные инфекции, особенно во время беременности или при ее планировании.

Как оценивать результат?

При анализе результатов не стоит забывать, что каждая лаборатория ориентируется на свои нормальные показатели, поэтому оценивать результат анализа можно только имея перед глазами нормальные значения всех показателей для конкретной лаборатории. Закономерность появления специфических иммуноглобулинов различных классов имеет большое практическое значение, помогая определять не только факт, но и время инфицирования. При определении антител можно сделать вывод о том, как давно произошло заражение: при обнаружении только антител IgM человек заразился совсем недавно. Если же обнаруживается только IgG, а IgM отсутствует, то заражение произошло давно, и организм уже выработал иммунитет.


Фаза заболевания IgM IgA IgG
Отрицательный результат
Первые 2 недели +
2,5 — 3 неделя + +
3 — 4 неделя + + +
Выздоровление Снижение титра в 2-4 раза после лечения Снижение титра в 4 раза после лечения
Хроническая фаза +/— +
Обострение (через 2 недели после начала обострения) + +
Излеченная инфекция +

К сожалению, такое важное преимущество ИФА, как количественное определение антител, не имеет большого значения в практической работе — т.е. не позволяет точно установить диагноз и не влияет на дозировку и сроки назначения лекарственных средств. При обнаружении иммуноглобулинов различных классов (IgM, IgG, IgA) не стоит забывать о том, что это только антитела, а не сами возбудители. Поэтому между обнаружением в крови и других средах антител и наличием в организме инфекции никогда нельзя ставить знак равенства.

Что необходимо для подтверждения диагноза?

Хотя иммуноферментную диагностику нельзя считать абсолютно совершенной, она, тем не менее, достаточно надежна и точна. При диагностике желательно учитывать следующие моменты. Во-первых, стремиться к проведению исследования в самом раннем сроке от начала заболевания. Во-вторых, определять одновременно специфические антитела разных классов, как минимум M и G. Это особенно необходимо для диагностики первичной инфекции. Кроме того, исследование IgG необходимо проводить в парных сыворотках с интервалом не меньше 10 дней. В-третьих, использовать количественное определение антител, для оценки их динамики во времени.
четвертых, использовать анализ уровня авидности IgG для дифференциации активной и скрытой инфекции. В-пятых, нужно иметь в виду, что антитела могут не выявляться у лиц со сниженным иммунитетом в результате перенесенных ранее инфекций, при белковом голодании и т.д. Для постановки диагноза, кроме ИФА, используют лабораторные тесты для идентификации возбудителя, инструментальные методы обследования и клиническую диагностику (клинический опыт врача). Естественно, что только по наличию тех или иных антител не может быть поставлен достоверный диагноз заболевания. Необходимо одновременно выявлять антитела к возбудителю методом ИФА и выявлять возбудителя методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) или ПИФ (прямая иммунофлюоресценция). Не стоит забывать, что качество Вашего обследования и лечения зависят от Вашего доктора и от Вас. Тесное сотрудничество с доктором и активное участие в обследовании позволит ему поставить правильный диагноз и назначить правильное лечение. Ваше здоровье — в Ваших руках!

www.health-ua.org

Особенности проведения ИФА анализа крови

Анализ крови методом ИФА позволяет определять антитела или антигены в пробе крови пациента. Это исследование применяется для определения содержания иммуноглобулинов, гормонов, а также иммунологических комплексов.

ИФА анализ крови назначают пациентам в следующих случаях:


  • с целью диагностики инфекций, передающихся половым путем (микоплазмы, уреаплазмы, хламидиоза, сифилиса, трихомонады);
  • для определения вирусных заболеваний (герпеса, цитомегаловируса, гепатита, вируса Эпштейна-Барра);
  • для выявления уровня гормонов;
  • для диагностики онкологических заболеваний;
  • с целью определения иммунодефицита;
  • для диагностирования аллергий;
  • перед некоторыми операциями в качестве комплексного обследования;
  • для оценки эффективности лечения.

Действие ИФА основано на определении иммуноглобулинов (специфических белков-антител) в сыворотке крови. Данные вещества вырабатывает иммунная система человека в случае проникновения в организм чужеродных микроорганизмов — антигенов. Эти иммунные молекулы способны связываться с множеством патогенов в организме и нейтрализовать их. Благодаря такому свойству, как специфичность, иммуноглобулины связываются с определенным антигеном и образуют так называемый комплекс антиген-антитело. Этот комплекс исследуют по качественным и количественным характеристикам во время проведения данного теста.

Специалисты выделяю пять классов иммуноглобулинов. Но чаще всего во время исследований определяют только три класса – A, M и G. Эти антитела имеют свойство накапливаться в человеческом организме в разный период от момента заражения.

Иммуноглобулины класса М (IgM) можно наблюдать в крови человека уже на 5 сутки от момента инфицирования. Они присутствуют в организме около 5–6 недель, после чего исчезают из кровотока. Они указывают на острое течение заболевания либо его обострение в случае хронического течения.


Иммуноглобулины класса G (IgG) появляются в крови человека через 3–4 недели с момента заражения. Они способны существовать в ней на протяжении нескольких месяцев или даже лет. По расшифровке ИФА анализа крови увеличение количества данных веществ говорит о текущей инфекции либо же реинфекции — повторном инфицировании.

Говоря об иммуноглобулинах класса А (IgA), их можно наблюдать в крови пациента спустя 2–4 недели после заражения или обострения инфекционного заболевания. Они исчезают из кровотока спустя 2–8 недель после уничтожения инфекционных агентов, и таким образом подтверждают излечение от инфекции.

В том случае, если после окончания заболевания в расшифровке ИФА анализа крови определяется присутствие антител IgA, это говорит о том, что болезнь перешла в хроническую форму.

В основном для проведения анализа крови методом ИФА материалом выступает венозная кровь пациента. Но также исследовать можно спинномозговую жидкость, содержимое стекловидного тела, а также околоплодные воды.

Сдавать кровь следует натощак (пациенту необходимо соблюсти 12-ти часовой интервал между анализом и последним приемом пищи). Если человек принимает лекарства, он должен сообщить об этом специалисту, так как некоторые медикаменты способны искажать результаты анализа. Также на достоверность показателей исследования оказывает влияние прием алкоголя и наркотиков.

В бланке результата этого исследования указывают позитивный (+) либо негативный (-) результат наличия каждого класса иммуноглобулинов. Предлагаем рассмотреть расшифровку ИФА анализа крови.

  1. Негативный результат IgM, IgG, IgA говорит об отсутствии иммунитета к инфекции.
  2. Негативный результат IgA, IgM и позитивный IgG свидетельствуют о постинфекционном или поствакцинальном иммунитете.
  3. Негативный или позитивный результат IgG, IgA и позитивный результат IgM указывают на острую инфекцию.
  4. Позитивный результат IgG, IgM, IgA является показателем обострения хронической инфекционной болезни.
  5. Негативный результат IgM и негативный либо положительный результат IgA, IgG указывают на хроническую инфекцию.
  6. Негативный результат IgM и отсутствие IgA, IgG являются подтверждением выздоровления пациента.

Анализ крови методом ИФА характеризуется рядом преимуществ:

  • высокой точностью;
  • возможностью проведения ранней диагностики инфекционного процесса;
  • высоким уровнем унификации;
  • коротким периодом времени, необходимым для получения результата;
  • удобством в работе;
  • автоматизацией всех этапов исследования;
  • относительно небольшой стоимостью.

Недостатком данного метода может выступать его свойство иногда давать ложноположительные или ложноотрицательные результаты. Помимо технических ошибок при проведении ИФА среди причин ложных результатов выделяют ревматоидный фактор у человека, наличие у него хронических заболеваний, применение лекарств, а также нарушения обмена веществ.

ИФА анализ крови на паразитов

ИФА анализ крови на паразитов Очень часто врачи назначают ИФА анализ крови на паразитов. Он позволяет выявить наличие в организме многих паразитарных процессов, в частности:

  • аскаридоза;
  • трихинеллеза;
  • цистицеркоза;
  • тениоза;
  • фасциолеза;
  • описторхоза;
  • лямблиоза;
  • висцерального и кожного лейшманиоза;
  • амебиаза;
  • токсоплазмоза.

Специфичность этого метода при определении паразитов равна примерно 90%. Благодаря ему можно определить вид паразитов, их количество, а также проследить динамику развития данных процессов.

www.wjtoday.ru

Что такое анализ крови, проводимый методом ИФА

immunoglobulins-h4eЭто лабораторное исследование, которое позволяет определять наличие специфических антител (защитных факторов крови белковой природы) к определенным антигенам (болезнетворным агентам). Среди антител первостепенное значение имеют иммуноглобулины, которые могут существовать в виде иммунокомплексов.

Иммуноглобулины вырабатываются вследствие сложных нейрогуморальных  реакций  иммунитета человека, возникающих как ответная реакция на внедрение чужеродных антигенов. На каждый вид болезнетворного агента вырабатываются свои специфические антитела. Действуют они путем «связывания» антигена или патологического микроорганизма, образую комплексное соединение «антиген-антитело» с последующей нейтрализацией, ферментативным лизисом, реакциями фагоцитоза и выводом из организма.

Обратите внимание: именно по наличию определенных комплексов методом ИФА определяется вид возбудителя или имеющегося у больного вредного вещества.

Узнать базовые принципы функционирования иммунитет человека вы сможете, посмотрев данный видео обзор:

Какие бывают иммуноглобулины

Открыто и изучено 5 основных классов иммуноглобулинов – IgА, IgM, IgG, IgD, IgE.  роль остальных еще до конца не выяснена и она находятся в стадии научного исследования.

Обратите внимание: наиболее важное в практической медицине значение имеют иммуноглобулины классов – А, М и G. Информативность определения основана на разных временных промежутках их появления, максимума и исчезновения.

Рассмотрим этот вопрос более детально.

image020

Основная задача иммуноглобулина А (IgA) заключается в защитных функциях слизистых оболочек дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта и мочевыделительной системы. При остром начале заболевания выявить их невозможно. Появляются эти защитные комплексы лишь со 2 недели начала заболевания, иногда позже. Основная масса иммуноглобулина А сосредоточена в слизистых тканях. Ориентировочно около 80%. Остальные антитела циркулируют в крови. Основная функция – обезвреживание и уничтожение микроорганизмов. После стихания острых проявлений заболевания количество этих иммуноглобулинов начинает уменьшаться и полностью уходит на сроке до 8 недель после начала болезни. Если IgA обнаруживаются в более поздние сроки, то это свидетельствует о хронизации процесса.

Главными и первыми маркерами острой фазы развивающейся патологии являются иммуноглобулины класса М (IgM). Обнаруживаются они к 5 суткам начала недомогания. Определить их наличие в крови можно около 6 недель. Затем они начинают быстро исчезать.

Остаточный иммунный ответ характеризует наличие в крови иммуноглобулинов класса G (IgG). Появление этих факторов в крови обнаруживается примерно через месяц после начала болезни. В дальнейшем они могут определяться в течение многих месяцев, лет и даже всю жизнь, выполняя защитную функцию от возврата (рецидива) болезни, а в некоторых случаях делая невозможным  вторичное развитие патологии. Если же количество иммуноглобулина G начало вновь расти, то можно подозревать повторное заражение. Подобный вывод можно сделать путем проведения двух-трех проб, сделанных с промежутком в 2 недели.

Иммуноглобулин Е (IgE) используется в практике паразитологии.

Иммуноглобулин D (IgD) располагается на B-лимфоцитах, находится в небольшой концентрации у здоровых людей. После 10 года жизни достигает максимальных значений. Количество иммуноглобулина D увеличивается при беременности, у больных системными заболеваниями соединительной ткани, бронхиальной астмой, заболеваниями, вызванные иммунодефицитным состоянием.

Показания к назначению иммуноферментного анализа крови

Определение антител к наличию в организме болезнетворных микробов, вызывающих:

  • сифилис;
  • трихомоноз;
  • уреаплазмоз и микоплазмоз.

Имеется рост количества иммуноглобулинов и при глистных инвазиях.

Диагностика проводится для обнаружения:

  • герпетических заболеваний;
  • группы вирусных гепатитов;
  • вируса Эпштейна-Барра;
  • цитомегоаловируса.

При помощи ИФА можно определять наличие антител к 600 видов аллергенов, обнаруживать состояние иммунодефицита, проводить комплексное обследование перед трансплантологическими операциями, проводить комплексный анализ на предмет эффективности лечения.

ИФА является дополнительным методом обнаружения онкологических клеток.

Как проводится ИФА крови

Image 571Для иммуноферментного анализа в большинстве случаев используется кровь пациентов, иногда производят забор ткани стекловидного тела, жидкости спинномозгового канала, околоплодных вод.

Кровь набирают через инъекционную иглу в шприц из локтевой вены. Исследование проводят натощак. Следует помнить, что прием некоторых медицинских препаратов может влиять на результат анализа. Перед сдачей крови необходимо воздержаться от курения, приема алкоголя. Исказить результаты может прием наркотических веществ.

В случае отрицательных значений иммуноглобулинов IgM, IgG, IgA можно говорить об отсутствии заболевания или его начальной фазе, также результат с минусами возможен при полном выздоровлении по прошествии значительного количества времени.

Если IgA и IgM не обнаружены, а IgG проявляется положительно, то по всей вероятности речь идет о сформированном иммунитете после инфекционного заболевания, или после прививки.

ИФА1В случае высокого титра IgM при отрицательных значениях IgG, IgA можно делать вывод о наличии остро протекающего инфекционного заболевания.

Одновременные положительные значения результатов иммуноглобулинов – IgA, IgM, IgG характерны для острой фазы рецидива имеющегося хронического заболевания.

Для хронической инфекции, находящейся в фазе стихания процесса (ремиссии) ИФА показывает отрицательные значения иммуноглобулина M (IgM), при этом результат иммуноглобулинов G (IgG) и A (IgA) будет положительным.

Преимущества метода иммуноферментного анализа крови

Главными достоинствами метода ИФА являются:

  • невысокая себестоимость анализа;
  • диагностическая специфичность, точность;
  • динамический контроль (повтор анализа для определения эффективности лечения и стадий заболевания);
  • возможность проведения массовых обследований в очагах инфекции;
  • скорость получения результата;
  • относительная простота анализа;
  • возможность использования информационных технологий в обработке;
  • безопасность и безболезненность для пациента.

Есть ли недостатки у ИФА крови?

Главным отрицательным моментом исследования является возможность получения ложноотрицательных и ложноположительных данных. Причиной недоразумений могут стать технические недочеты, прием медикаментов, который может исказить картину.

Обратите внимание: фальсифицировать результат анализа может нарушение обменных процессов в организме. Осторожность в выводах надо соблюдать при сочетании нескольких хронических процессов у больного.

Иммуноферментный анализ крови в паразитологии

fighaematobium-144AF75661E07D1898BВозможность применения ИФА в диагностике паразитарных заболеваний определяется специфическим иммуноглобулином E (IgE), который имеет тенденцию к повышению именно при этой группе заболеваний. Кроме того, иммуноглобулин Е является маркером атопических реакций связанных с аллергическими процессами. В крови он находится в незначительных количествах. Основная его локализация – слизистые оболочки, базофилы, маркофаги. Главная функция этого белкового комплекса заключается в защите слизистых  оболочек организма. Но в тоже время он является участником иммунных реакций, направленных против паразитов. Активацией IgE «заведуют» эозинофилы и макрофаги. Это важный факт в сопоставлении данных анализа при установлении диагноза болезни.

ИФА применяется для обнаружения:

  • круглых гельминтов (аскарид, остриц);
  • острой и хронической формы описторхоза;
  • трихинеллеза;
  • наличия лямблий (как дополнительный анализ);
  • форм лейшманиоза;
  • амебиаза;
  • содержания токсоплазм;

Важно: иммуноглобулины вырабатываются в организме в качестве антител к определенным антигенам. Поэтому даже при самой высокой специфичности анализа не исключаются погрешности в точности. При паразитарных заболеваниях процент вероятности составляет около 90%.

В заключение необходимо отметить, что современная иммунология постоянно находится в стадии развития, поиска новых методов диагностики и лечения заболеваний. 

Степаненко Владимир, хирург

32,692 просмотров всего, 4 просмотров сегодня

    okeydoc.ru

    Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа

    Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей).

    Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген-антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом. Частицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины), способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген-антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.

    Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.

    Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.

    Также существуют иммуноглобулины класса А (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), Е (борются с паразитарными инфекциями) и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, болел ли когда-либо человек тем или иным недугом (например, краснухой или ветряной оспой).

    Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.

    Реакцию «антиген-антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.

    Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно, это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или — антитела, в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит — или не происходит — образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать выводе о результатах анализа.

    ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.

    Преимущества метода

    Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.

    ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.

    Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

    Недостатки метода

    К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.

    В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.

    ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

    Показания к назначению и выявляемые заболевания

    Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:

    1. Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
      • IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
      • IgG к ВИЧ;
      • Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
      • Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
      • Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
      • Ig M и IgG к токсоплазмозу;
      • Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
      • IgG к паразитарным заболеваниям;
      • Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
      • IgG к хеликобактерной инфекции.
    2. Общая оценка показателей иммунитета человека и маркёров некоторых аутоиммунных заболеваний.
    3. Выявление онкологических маркёров (фактора некроза опухоли, простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других).
    4. Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).

    Анализируемый биоматериал и особенности его забора

    Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

    Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.

    Сроки готовности результатов ИФА

    При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.

    Расшифровка иммуноферментного анализа

    Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

    Анализируемые показатели

    • IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
    • IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
    • IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
    • IgG говорит либо о хронизации заболевания либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.

    Возможные результаты ИФА

    В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.

    Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).

    Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.

    www.kp.ru


Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

*