Анализ ифа что это

ИФА или иммуноферментный анализ — современный способ определения многих патологий, в том числе инфекционного характера. Проводится исследование в лабораторных условиях. Основной задачей методики является выявление антител, их наличие указывает на проникновение в организм патогенных агентов. Современная медицина использует анализ ИФА для диагностики многих заболеваний и определения сторонних соединений.

Анализ ИФА

Анализ ИФА: когда и как проводится

Методом ИФА специалистам удается выявить наличие специфических антител (иммуноглобулинов) в сыворотке крови и определить антигены. Иммуноглобулины вырабатываются вследствие сложных нейронных процессов, осуществляемых защитными функциями организма. Они являются естественной реакцией иммунитета на проникновение инородных агентов. На каждый тип патогенного микроорганизма вырабатываются специфические антитела.

Важно: по наличию определенных комплексов, методика иммуноферментного анализа позволяет выявить тип возбудителя в организме человека.

Диагностика посредством ИФА производится для обнаружения следующих заболеваний:


  • герпеса;
  • гепатита вирусного типа;
  • вируса Эпштейна-Барра (герпеса 4 типа);
  • цитомегоаловируса.

Исследование крови позволяет выявить основные болезнетворные бактерии, провоцирующие развитие сифилиса, уреаплазмоза и трихомоноза. Посредством анализа, специалисты определяют антитела к 600 видам аллергенов. Проведение иммуноферментного исследования уместно при подготовке к трансплантации органов.

Важно: в некоторых случаях, ИФА выступает дополнительной методикой определения онкологии в организме человека.

Анализ проводится исключительно в лабораторных условиях. Для исследования осуществляется забор венозной крови из локтевой вены. Результаты анализа будут доступны на следующие сутки. Для получения достоверной информации, специалисты рекомендуют соблюдать правила подготовки к ИФА:

  • за сутки до исследования необходимо отказаться от употребления острой и копченой пищи;
  • алкоголь находится под запретом;
  • кровь сдается в утренние часы на голодный желудок;
  • перед исследованием необходимо исключить любые физические и эмоциональные нагрузки;
  • целесообразно отказаться от курения.

Важно: соблюдение всех подготовительных рекомендаций, позволит получить достоверный результат.

Какие патологии выявляет иммуноферментный анализ

Методом иммуноферментного анализа специалист определяет различные классы иммуноглобулинов, наличие которых указывает на развитие патологических процессов в организме. Так, основными показателями ИФА являются IgM и IgG. Наличие иммуноглобулина IgM указывает на развитие острого патологического процесса. Показатель IgG в крови характерен для стадии выздоровления.

Посредством анализа ИФА специалисты выявляют ряд опасных заболеваний. К их числу относят:

  • патологии вирусного типа. В частности, краснуху, грипп, гепатит и герпетические заболевания;
  • патологии бактериального типа. К их числу относят туберкулез, дифтерию и коклюш;
  • патологии инфекционного типа. В частности, воспаление легких, сепсис, хламидиоз, тонзиллит и пиелонефрит;
  • патологии паразитарного типа;
  • грибковые заболевания.

Важно: анализ ИФА назначается для подтверждения сифилиса при получении положительного результата путем сдачи крови на РВ.

Своевременная диагностика позволяет отследить эффективность проводимой терапии и в случае необходимости, провести ее корректировку.

Расшифровка анализа: положительный и отрицательный ответ

Расшифровка результатов ИФА осуществляется специалистом, на основании полученных данных. Ответ может быть как положительным, так и отрицательным.

Положительный ИФА

Результат считается положительным, если в ходе исследования в крови были обнаружены иммуноглобулины класса IgG и IgM. Наличие представленных компонентов указывает на развитие следующих заболеваний:


  • сифилиса;
  • гепатита вирусного типа;
  • ЦМВИ (цитомегаловируса);
  • герпеса;
  • ветряной оспы;
  • болезней, провокаторами которых выступают стафилококки и стрептококки;
  • хламидиоза.

При развитии сифилиса, специфические антитела обнаруживаются в крови спустя 14 суток после заражения. По их количеству специалист определяет тяжесть течения болезни. Активная терапия сифилиса позволяет устранить все бактерии через 6 месяцев. Если лечение отсутствует, на полное восстановление организма уйдет не менее 1,5 лет.

Анализ ИФА выявляет гепатит вирусного типа еще в инкубационном периоде, до появления первых симптомов.

ЦМВИ является распространенной патологией, которая встречается у каждого третьего человека. Для населения она не несет опасности, инфицирование происходит в утробе матери.

В норме, антитела к герпетическому вирусу в организме человека отсутствуют. При их обнаружении принято диагностировать острую фазу заболевания.

При развитии ветряной оспы, в крови человека обнаруживаются специфические иммуноглобулины IgM. Они способны сохраняться в организме на протяжении 2-х лет, после полной ликвидации патологии.

Определить болезни, вызванные стрептококками и стафилококками, позволяет двукратная сдача анализа на ИФА. При повторном исследовании, уровень специфических антител стремительно возрастает.

На развитие хламидиоза указывает высокий уровень иммуноглобулина — 1:8 и выше. Показатель способен варьироваться в зависимости от прогрессирования болезни.


Внимание: для подтверждения развития определенного патологического процесса, специалист назначает дополнительные лабораторные и инструментальные исследования. Комплексное исследование позволяет назначить эффективную схему лечения.

Отрицательный ИФА

При отрицательном результате, в крови человека не обнаруживаются специфические иммуноглобулины класса IgM. Возможно наличие IgG, антитела способны сохранятся в организме после перенесенных заболеваний, бактериального и вирусного типа. В некоторых случаях, их наличие в сыворотке крови сохраняется на протяжении десятков лет.

Внимание: правильно расшифровать результаты анализа способен только опытный специалист.

Самостоятельное изучение ответов в большинстве случаев приводит к попыткам постановки диагноза и назначения некорректного лечения, без участия врача. Такое воздействие считается идеальным для дальнейшего прогрессирования патологического процесса.

perelomu.net

Принцип методики ИФА


Иммуноферментный анализ является иммунологической реакцией. Она основана на добавлении специфических антител Принцип анализа ИФАили антигенов в исследуемую среду (чаще всего исследуемая кровь) с последующим ферментативным определением концентрации образовавшихся комплексов антиген-антитело. По концентрации  комплекса можно судить об уровне или активности определяемого соединения в исследуемой среде.

Определение концентрации комплексов антиген-антитело обычно осуществляется при помощи специальной аппаратуры хроматографическим методом.

Показания к проведению

ИФА анализ проводится по различным показаниям, основными из них в клинической медицине являются:

  • Диагностика инфекционной патологии с преимущественно половым путем передачи (ИППП), к которым относятся хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз, трихомониаз, при этом выявляются специфические антитела к возбудителю инфекции.
  • Диагностика инфекционных заболеваний различной локализации для определения стадии патологического процесса, в первую очередь в процессе диагностики парентеральных вирусных гепатитов и ВИЧ.
  • Определение концентрации гормонов для диагностики различной патологии органов эндокринной системы (железы внутренней секреции).
  • Определение различных соединений для диагностики причины интоксикации организма при отравлениях, укусах насекомых или змей.

При этих медицинских показаниях выполняется анализ крови ИФА. Также данная методика активно применяется в экспериментальной медицине во время проведения различных клинических исследований во время разработки новых лекарственных средств, вакцин для иммунопрофилактики.

Как проводится исследование

Специальный анализатор для проведения ИФААнализ крови методом ИФА проводится в условиях специализированной лаборатории. Предварительно для его проведения забирается венозная кровь, обычно из локтевой вены в объеме 5-10 мл, которая затем отправляется в лабораторию. В среднем результат анализа можно получить уже на следующий день, что является важным моментом для скорейшего назначения лечения после установления диагноза заболевания.

Как подготовиться к ИФА

Для получения достоверных результатов исследования методом иммуноферментного анализа следует придерживаться несколько несложных подготовительных рекомендаций, к которым относятся:

  • За день до сдачи анализа следует отказаться от употребления в пищу жирных продуктов питания (мясо, копчености) и алкоголя.
  • Материал для исследования необходимо сдавать утром натощак.
  • В день исследования желательно избегать физических и психоэмоциональных нагрузок.
  • Перед исследованием необходимо постараться не курить.

Выполнение этих рекомендаций необходимо для исключения получения ложноположительного результата ИФА.

Большинство полученных ложноположительных результатов иммуноферментного анализа крови бывает вследствие неправильного выполнения подготовительных рекомендаций. Это в большинстве случаев связано с употреблением в пищу жирных продуктов питания, которые приводят к увеличению концентрации триглицеридов (жиры) в плазме крови, которые снижают специфичность проводимого ИФА.

Расшифровка результатов

Анализ крови на антитела при помощи ИФА имеет 2 модификации – качественное и количественное определение. При Взятые пробы плазмы для проведения ИФАкачественном определении антител результат может быть положительным (антитела выявлены, что указывает на возможное наличие патологического процесса, вызванного возбудителем инфекции) или отрицательным (антител нет, что свидетельствует об отсутствии инфекционного процесса).


Отсутствие антител не всегда является стопроцентным показателем отсутствия инфекционного процесса. Это связано с тем, что после заражения антитела образуются не сразу, а в течение определенного периода времени (минимум около 2-х недель). Поэтому для подтверждения отсутствия инфекции проведение ИФА может повторяться через некоторое время.

При количественном ИФА выполняется определение титра (активности) антител, а также их классов. В большинстве случаев для диагностики инфекционных заболеваний проводится определение антител класса IgG (иммуноглобулины G) и IgM (иммуноглобулины М), которые образуются в организме через различные промежутки времени после инфицирования, поэтому расшифровка результата анализа может иметь несколько значений:

  • Повышение активности IgМ и отсутствие IgG – свидетельство недавнего инфицирования и острого течения инфекционного процесса.
  • Повышение активности IgМ и IgG – обострение инфекционного процесса при его хроническом течении и давнем заражении.
  • Высокая активность IgG и отсутствие IgМ – хроническое течение инфекционного процесса на фоне давнего заражения, после которого прошло более полугода (время, необходимое для образования антител класса IgG).

В целом расшифровка результатов ИФА для каждого инфекционного процесса имеет определенные особенности. Более точное определение наличия инфекционного заболевания, а также стадии его течения проводит врач.


ИФА на сегодняшний день является методом выбора диагностики большинства инфекционных заболеваний. На основании результатов такого исследования врач имеет возможность установить точный диагноз и определить стадию течения патологического процесса для назначения последующего адекватного и эффективного лечения.

prof-med.info

Преимущества, которыми располагает ИФА по сравнению с другими методами детекции антигенов и антител:

  • высокая чувствительность, которая, составляющая 90%;
  • стабильность при хранении всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА (год и более);
  • быстрота и удобство проведения диагностической реакции;
  • возможность использовать минимальные объемы исследуемого материала;
  • возможность автоматизации всех этапов проведения реакции;
  • небольшая стоимость диагностических наборов;
  • возможность ранней диагностики инфекции;
  • унифицированность и пригодность для массовых обследований;
  • легкость в отслеживании динамики развития процесса инфекционного заболевания.

Недостаток — относясь к непрямым методам диагностики, он позволяет определить иммунный ответ организма на возбудителя, а не самого возбудителя.


Метод иммуноферментного анализа используется для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций и для определения наличия антител классов (IgA, IgM, IgG) к антигенам различных возбудителей (вирусные гепатиты, ВИЧ, сифилис, TORCH, хламидиозы, паразитозы). С помощью ИФА можно определить антитела к любой инфекции, при условии, конечно, что организм их выработал. Этот метод позволяет различать острые и хронические формы заболеваний, выделять стадию заболеваний и выявлять практически здоровых носителей и контролировать вакцинацию. Необходимо заметить, что наличие антител в сыворотке крови или в патологическом материале может свидетельствовать лишь о контакте организма с возбудителем в настоящее время или в прошлом.

Для постановки диагноза,  ИФА диагностики, используют лабораторные тесты для идентификации возбудителя, инструментальные методы обследования и клиническую диагностику (клинический опыт врача). Естественно, что только по наличию тех или иных антител не может быть поставлен достоверный диагноз заболевания. Необходимо одновременно выявлять антитела к возбудителю методом ИФА и выявлять возбудителя методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) или другими методами.

Стоимость анализа ИФА в нашем медцентре

р.д. — рабочий день, кол. — количественный, кач. — качественный, п.кол — полуколичественный

* Исследование в режиме CITO:

— поступление биологического материала до 14.00 — выдача результатов исследований после 19.00 в тот же день по факсу или электронной почте;

— поступление биологического материала после 14.00 — выдача результатов исследований до 13.00 следующего дня по факсу или электронной почте.

rammedic.ru

Область применения метода ИФА

Возможности иммуноферментного анализа поистине обширны. Теперь и представить себе трудно, как можно обойтись без подобных исследований, применяемых буквально во всех отраслях медицины. Кажется, что может сделать ИФА в онкологии? Оказывается, может. И многое. Способность анализа находить маркеры, свойственные некоторым видам злокачественных  новообразований, лежит в основе раннего выявления опухоли, когда другим способом она еще не определяется из-за своих небольших размеров.

5468468684648Современная клиническая лабораторная диагностика (КДЛ), кроме онкомаркеров, располагает значительным арсеналом панелей для ИФА и использует их для диагностики различных патологических состояний (инфекционных процессов, гормональных нарушений) и мониторинга фармацевтических лечебных препаратов с целью выявления их влияния на организм больного и, кстати, не только человека. В настоящее время иммуноферментный анализ широко используется и в ветеринарной службе, ведь «братья наши меньшие» тоже подвержены многим заболеваниям, от которых, порой, очень сильно страдают.

Таким образом, ИФА, благодаря своей чувствительности и специфичности, по образцу крови, взятому из вены, может определить:

  • Гормональный статус (гормоны щитовидной железы и надпочечников, половые гормоны);
  • Присутствие вирусной и бактериальной инфекции (ВИЧ, гепатиты В и С, хламидиоз, сифилис, уреа- и микоплазмоз, герпетическая и TORCH-инфекции, а также многие другие болезни, вызванные патогенными микроорганизмами);
  • Следы жизнедеятельности микроорганизмов, возбудивших  инфекционный процесс, который благополучно закончился и перешел в стадию  формирования  иммунного ответа на этот возбудитель. Такие следы, то есть, антитела, во многих случаях остаются циркулировать в крови пожизненно, чем защищают человека от повторного заражения.

В чем суть ИФА?

Иммуноферментный метод, позволяет определить не только присутствие самого возбудителя (качественный анализ), но и его количественное содержание в сыворотке крови больного.

Вирусовая или бактериальная доза существенно влияет на течение инфекционного процесса и его исход, поэтому количественному анализу отведена не последняя роль в диагностике и лечении заболеваний в различных формах и стадиях.

Однако зная иммуноферментные исследования, как метод ИФА, мы даже не задумываемся, как же ему удается охватить такой широкий круг микроорганизмов, населяющих нашу планету, многие из которых несут прямую угрозу здоровью и жизни человека и животных. А дело в том, что  ИФА имеет много вариантов (неконкурентный и конкурентный – прямой и непрямой), каждый из которых решает свою задачу и, таким образом, позволяет проводить целенаправленный поиск.

Для выявления иммуноглобулинов того или иного класса используется традиционная 96-луночная полистироловая панель (планшет), в лунках которой в твердой фазе сосредоточены сорбированные рекомбинантные белки. Попавшие в лунку с сывороткой крови антитела или антигены, находят «знакомый» объект и образуют с ним комплекс (АГ – АТ), который, закрепившись ферментным конъюгатом, при считывании результатов проявится изменением окраски лунки.

54684864468

Иммуноферментный анализ проводится на тест-системах определенной специфичности, изготовленных в специальных лабораториях и укомплектованными всеми необходимыми реагирующими компонентами. Исследования можно проводить с помощью промывных аппаратов («вошеров») и считывающих  спектрофотометров, где большей частью задействован ручной труд.  На полных автоматах, освобождающих лаборанта от монотонного закапывания, промывания и прочих рутинных дел, конечно, работать быстрее и удобнее, но не все лаборатории могут позволить себе такую роскошь и продолжают работать по старинке – на полуавтоматах.

Интерпретация результатов ИФА находится в компетенции врача лабораторной диагностики, при этом обязательно берется в расчет и присущее практически всем иммунохимическим реакциям свойство давать ложноположительные или ложноотрицательные ответы.

Видео: современное проведение иммуноферментного анализа

Результаты ИФА на примере сифилиса

Иммуноферментный анализ подходит для выявления всех форм сифилиса, а, кроме этого, применяется в проведении скрининговых исследований. Для проведения анализа используют венозную кровь пациента, взятую натощак. В работе используются планшеты с определенной специфичностью (АТ классов А, М, G) или суммарные антитела.

5468486468

Учитывая то, что АТ при сифилисе продуцируются в конкретной последовательности, ИФА может легко ответить на вопрос, когда произошло заражение и в какой стадии находится процесс, а расшифровка полученных результатов может быть представлена в следующем виде:

  • IgM указывают на продолжительность инфекционного процесса (могут появляться при обострении хронических воспалительных заболеваний);
  • IgA констатируют, что заражение случилось более месяца назад;
  • IgG свидетельствуют о том, что инфекция находится в самом разгаре или о проведенном недавно лечении, что легко выясняется при сборе анамнеза.

При проведении анализа на сифилис, лунки с отрицательным ответом (и отрицательный контроль) останутся бесцветными, в то время как положительный результат (как и положительный контроль) даст ярко-желтое окрашивание за счет изменения цвета хромогена, добавленного в ходе исследования. Однако интенсивность окраски не всегда совпадает с контролем, то есть, она может быть немного бледнее или слегка желтоватой. Это сомнительные результаты, которые, как правило, подлежат повторному исследованию с обязательным учетом количественных показателей, полученных на спектрофотометре, но в целом, окраска находится в прямо пропорциональной зависимости от количества иммунных комплексов (связанные между собой АГ и АТ).

Самый волнительный из иммуноферментных анализов – ИФА на ВИЧ

Анализ на ВИЧ, пожалуй, больше других интересен широкому кругу населения, ведь пока нельзя с уверенностью утверждать, что исчезли многие социальные проблемы (проституция, наркомания и др.). К сожалению, ВИЧ затрагивает не только эти слои человеческого общества, заразиться можно при различных обстоятельствах, не связанных с половой распущенностью или приемом наркотиков. Но коль возникла необходимость обследования на ВИЧ, то бояться не следует, что все вокруг узнают о посещении такой лаборатории. Сейчас ВИЧ-инфицированные люди защищены законом, а сомневающиеся могут обратиться в анонимные кабинеты, где можно решить проблему, не боясь огласки и осуждения.

Иммуноферментный метод, применяемый для диагностики ВИЧ инфекции, относится к первостепенным стандартным исследованиям, которые, однако, требуют особых условий, поскольку тема очень деликатная.

ИФА на ВИЧ имеет смысл проводить после полового контакта, переливания крови, других медицинских манипуляций, предполагающих заражение, и по окончании инкубационного периода («серонегативное окно»), но следует учитывать, что этот промежуток времени не является постоянным. Он может закончиться через 14-30 дней, а может продолжаться до полугода, поэтому средним значением принято считать интервал от 45 до 90 дней. На ВИЧ кровь сдают так же, как и на другие инфекции – из вены на голодный желудок. Результаты будут готовы в зависимости от накопления материала в лаборатории и ее загруженности (от 2 до 10 дней), хотя чаще всего лаборатории обеспечивают получение ответа в тот же день или на следующий.

Что можно ожидать от результатов на ВИЧ?

546846848ИФА на ВИЧ-инфекцию определяет антитела к двум разновидностям вируса: ВИЧ-1 (более распространенный в России и других странах Европы и Азии) и ВИЧ-2 (встречающийся чаще на территории Западной Африки).

Задачей ИФА ВИЧ является поиск АТ класса G, которые выявляются на всех тест-системах, но в более позднем периоде, и АТ классов А и М, выявляемых на рекомбинантных тест-наборах нового поколения, позволяющих найти антитела на самых ранних стадиях (инкубационный период – «серонегативное окно»). От ИФА можно ожидать следующие варианты ответов:

  1. Первичный положительный результат: кровь подлежит перепроверке на тест-системе такого же типа, но по возможности другой серии и другим человеком (лаборантом);
  2. Повторный (+) предполагает новый забор крови у пациента с исследованием ее подобно первичному анализу;
  3. Очередной положительный результат подлежит референтному анализу, при котором используются высокоспецифичные тест-наборы (2-3 шт.);
  4. Положительный результат в обеих (или в трех) системах направляется на иммуноблотинг (тот же ИФА, но выполненный в индивидуальном порядке на тест наборах особо высокой специфичности).

Заключение о ВИЧ инфицировании выносится только на основании иммуноблотинга. Проводится беседа с инфицированным в условиях полной конфиденциальности. Разглашение медицинской тайны в России, как, впрочем, и в других странах, подлежит уголовному наказанию.

ИФА находит хламидию, цитомегаловирус и даже паразитов

Анализы на хламидии и цитомегаловирус иммуноферментным методом также обрели особую популярность, ввиду того, что позволяют определить время заражения, стадию заболевания и эффективность лечебных мероприятий.

5468486684

При внедрении хламидии тоже можно наблюдать появление антител различных классов в разных фазах патологического состояния, вызванного инфекционным агентом:

  • IgM могут обнаружиться уже дней через семь после заражения;
  • IgA говорят о том, что инфекция в организме живет уже более месяца;
  • IgG подтверждают диагноз хламидиоза, помогает следить за лечением и определить его действенность. Следует заметить, что антитела класса G остаются и циркулируют в организме независимо от давности болезни, поэтому для правильной расшифровки анализа нужно принимать во внимание референтные значения (нормы), которые, кстати, для каждой КДЛ свои: с учетом марки тест-системы и специфичности реагентов, входящих в набор. Значения нормы вписываются в бланк рядом с результатом ИФА.

Что касается цитомегаловируса (ЦМВ), то здесь несколько иначе: антитела класса М появляются приблизительно через месяц-полтора, то есть, положительным результат (IgM+) становится в фазе первичного инфицирования или при реактивации скрытой инфекции и остается таковым от 4 месяцев до полугода.

Наличие АТ класса G характерно для начала первичной острой инфекции или реинфекции. Анализ констатирует, что вирус имеет место, однако информации, в какой стадии находится инфекционный процесс – не дает. Между тем, определение нормы  титра IgG тоже вызывает затруднения, так как она целиком зависит от иммунного статуса конкретного человека, который, впрочем, устанавливается выявлением иммуноглобулинов класса G. Учитывая такое поведение антител, при диагностике ЦМВИ  возникает необходимость в оценке способностей антител класса G взаимодействовать с ЦМВ, чтобы потом «обезвредить» его (авидность АТ). На начальном этапе болезни IgG очень плохо связываются с антигенами вируса (низкая авидность) и лишь потом начинают проявлять активность, стало быть, можно говорить о повышении авидности антител.

Что такое паразиты – вряд ли стоит рассказывать, ведь они преследуют человека, начиная с детского возраста и, в полном смысле слова, отравляют ему жизнь (продукты жизнедеятельности паразитов очень ядовиты). Они бывают внушительных размеров (гельминты, а попросту – глисты) или маленькие (амебы, трихомонады, лямблии).

До появления в клинической лабораторной диагностике иммуноферментного метода найти паразитов было весьма сложно, теперь же, как говорят: «Нет проблем!». А все потому, что есть ИФА, который отыщет паразита, в какой бы форме тот не пребывал (цисты, личинки, яйца или взрослая особь) и в какой бы части человеческого тела не находился. Для этого нужно лишь взять кровь из вены и найти антитела, которыми организм уже ответил на чужеродные антигены.

О достоинствах иммуноферментного анализа можно говорить долго и много, ведь этот метод сумел решить многие диагностические задачи, используя лишь венозную кровь. Не нужно долгих ожиданий, волнений и проблем с забором материала для исследования. К тому же тест-системы для ИФА продолжают совершенствоваться и не за горами тот день, когда тест выдаст 100% достоверность результата.

izppp.ru


Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

*