Пцр хламидии что это


Хламидиоз относится к паразитарным заболеваниям, возбудителем которого являются внутриклеточные паразиты рода Chlamydia.

Одной из его опасностей является бессимптомное течение на начальных этапах или наличие симптомов, присущих иным инфекционным патологиям.

В этом заключается и трудность в постановке дифференциального диагноза при заражении хламидиями. Многие обычные методы диагностики не в состоянии с высокой долей достоверности определить присутствуют ли в организме патогенные микроорганизмы или нет. В этом случае предпочтение отдают такому виду исследования как Полимеразная Цепная Реакция (ПЦР).


На сегодняшний день большинство врачей, занимающихся заболеваниями мочеполовой системы, предпочитают направлять своих пациентов на этот вид обследования.

Что такое анализ ПЦР на хламидии, в чем заключается эффективность метода и как подготовиться к сдаче анализа?

Лаборатория

Что такое ПЦР?

Механизм исследования заключается в следующем. В образцах пациента ищут и выделяют фрагменты РНК и ДНК патогенных бактерий, на наличие которых берется анализ.

После добавления специальных реагентов эти участки, вступая с ними в полимеразную реакцию, начинают с большой скоростью увеличиваться, как в размере, так и в количестве.

Далее приходит очередь ферментов, так называемых аналитических маркеров, которые помогают обнаружить разросшиеся фрагменты. Конечно, если последние имеются.

Как сдавать такой анализ? Наиболее информативными будут образцы, взятые из непосредственных очагов инфекционного заражения.

Мазок на хламидии методом ПЦР чаще всего подразумевает забор материала из следующих мест:

  • секрет простаты;
  • уретра;
  • шейка матки;
  • влагалище.

В качестве материала для исследования могут использоваться кровь, моча и сперма.

Это совершенно безболезненная процедура, не требующая какой-либо серьезной подготовки.

Через 2-3 суток пациент может получить достоверные сведения о наличии или отсутствии в его организме бактерий, вызывающих хламидиоз.

Точность анализа позволяет определить наличие даже самого незначительного количества бактерий в образцах.

Исследование крови

Показания к назначению

Чаще всего ПЦР на хламидии назначается при следующих ситуациях:

  • при вынашивании ребенка;
  • в случае диагностирования заражения хламидиями полового партнера;
  • при бесплодии неизвестной причины;
  • при выраженной хламидийной симптоматике.

В последнее время во всех учреждениях, наблюдающих беременных женщин, рекомендуется обязательно сдавать анализ на хламидии методом ПЦР. Это обуславливается тем, что хламидиоз коварное и опасное заболевание.

При бессимптомном течении оно может передаваться плоду вертикальным путем, то есть через плаценту, либо непосредственно вовремя родов при прохождении ребенком родовых путей. Мать заражает ребенка не зная об этом.

Врожденный хламидиоз чреват серьезными патологиями в первые месяцы жизни и переходе заболевания в хроническую форму с острыми рецидивами.


Способен хламидиоз привести и к преждевременным родам.

При обнаружении в образцах будущей матери патогенного микроорганизма, женщине назначается лечение. Его основой станет использование антибактериальных средств — антибиотиков, безопасных и для будущей роженицы, и для еще не родившегося ребенка.

Забор крови из вены

Подготовка к исследованию

Особых подготовлений к процедуре не потребуется. Но есть ряд предписаний, выполнение которых обязательно перед забором образца. Это позволит получить максимально достоверный результат.

Среди них:

  • перед сдачей анализа необходимо ограничить половою жизнь (минимум 3 недели);
  • за месяц до забора образца нужно прекратить прием любых антибиотиков, способных каким-либо образом повлиять на хламидии;
  • в день процедуры категорически не рекомендуется использование антибактериальных средств при гигиенических процедурах, особенно в области половых органов;
  • за неделю до сдачи образца нужно прекратить использование любых местных препаратов, обладающих антибактериальным средством (свечи, крема, растворы для спринцевания).

Запрещен забор материала во время менструации.

Анализ мочи и крови

При необходимости исследования методом ПЦР крови, правила подготовки включают следующее:

  • после пробуждения и до сдачи образца для исследования, запрещено употребление любой пищи, жидкости и даже использование жевательной резинки;
  • за день до анализа необходимо разгрузить ЖКТ, употребляя исключительно постную пищу;
  • если прием лекарственных препаратов не является жизненно необходимым курсом, следует ограничить прием любых медикаментов за сутки до анализа.

Анализ мочи на полимеразную цепную реакцию требует соблюдения следующих рекомендаций:

  • для исследования нужен первый утренний образец;
  • материал следует поместить в герметичный контейнер, который можно приобрести в любой аптеке;
  • перед сбором образца тщательно подмываются наружные половые органы;
  • чтобы избежать смешивания материала с выделениями из влагалища, женщинам следует прикрыть его ватным тампоном на время сбора.

При несоблюдении этих предписаний велика вероятность получения ложноотрицательного или ложноположительного результата.


Это может повлечь за собой либо необходимость повторной сдачи анализа, либо возможность назначения неверного курса лечения, со всеми вытекающими последствиями.

Расшифровка результатов

Общие выводы из полученных результатов после сдачи анализа может сделать и человек не обладающий специальными знаниями. Но составить верную схему лечения, если оно необходимо, может исключительно специалист.

Расшифровка анализов

При «отрицательном» результате можно говорить о полном отсутствии хламидий в организме человека. В таком случае причину недомогания (если пациента что-то беспокоит) следует искать в ином.

Но при наличии явной симптоматики хламидиоза и «отрицательном» результате анализа следует использовать иные методы диагностики или пересмотреть мнение о компетенции лабораторного учреждения, проводившего исследование.

Анализ со знаком «+» подтверждает опасения — в организме присутствуют бактерии-возбудители хламидиоза. Но это не всегда означает наличие самого заболевания, так как хламидии присутствуют в организмах почти 60% здоровых людей.

Они могут активизироваться при наступлении благоприятных условий. Это означает что особой внимание следует уделять профилактике заболевания.

Количественная характеристика представителей патогенной микрофлоры определяется с помощью иных методов диагностики, например, культуральный анализ (бакпосев).

Недостатки методики


Как и любые методы исследования, мазок ПЦР на хламидии имеет и минусы.

Лабораторная пробирка

Среди них:

  1. Стоимость «выше среднего». Методика подразумевает использование дорогостоящих реагентов и оборудования, что, естественно, отражается и на цене анализа. По этой причине этот метод диагностики доступен только в частных медицинских учреждениях.
  2. С помощью ПЦР практически невозможно определить активность хламидий на ранних этапах течения болезни. Использование методики целесообразно только при наличии воспалительного процесса, вызванного деятельностью патогенной микрофлоры.
  3. Жесткие условия в период перед сдачей анализа. При их несоблюдении нередкость появление ложноположительного или ложноотрицательного результата, что увеличивает стоимость обследование, так как требуется дополнительные процедуры.

parazity-info.ru

Что такое хламидиоз?


Пцр хламидии что этоХламидиоз вызывают внутриклеточные микроорганизмы-паразиты хламидии. Они используют дыхательную систему клеток хозяина и полностью зависят от нее. Выделяют несколько видов хламидий: Chlamydia trachomatis (генитальная форма), Chlamydophila psittaci (вызывает орнитоз), Chlamydophila pneumoniae (воспаление легких, бронхит, синусит). Болеть этим недугом могут и животные. Хламидиоз у кошек вызывает серьезные проблемы с глазами, легкими, желудочно-кишечным трактом. Чтобы уточнить диагноз животного, стоит сделать анализ крови методом ИФА или ПЦР.

Чаще всего у мужчин и женщин встречается генитальная форма недуга. Хламидии поражают эпителий половых органов и могут вызвать осложнения в виде болезней органов мочевыделительной системы.Инфекция нередко приводит к развитию уретрита, эндоцервицита, эрозии шейки матки, артриту, бесплодию, патологиям во время беременности. Хламидии у мужчин часто становятся причиной возникновения простатита, цистита, атонии, атрофии предстательной железы, эпидидимита, проктита.

Вылечить это заболевание одними народными средствами без приема антибактериальных препаратов и антибиотиков невозможно. Но, например, при гельминтозах в комплексе с противопаразитарными препаратами русская тройчатка от паразитов помогает безотказно. В ее состав входят цветки пижмы, полынь горькая и гвоздика, обладающие мощным глистогонным эффектом, в том числе в отношении личинок.


Диагностику хламидиоза у женщин, мужчин проводят с помощью разных методик: культуральная (когда делают посев биоматериала на питательные среды для выращивания патогенной флоры), молекулярно-биологическая (ПЦР, техника Ван Слайка), сдача цитологического (взятие мазка), серологического анализа или ИФА (обнаружение антител к возбудителю болезни в крови). Расшифровка анализа содержится в соответствующей графе листка с результатами, но правильно интерпретировать их может только врач. Лечение хламидиоза у женщин включает в себя антибиотикотерапию, прием противомикробных, иммуномодулирующих, гепатопротекторных лекарств.

Как делают анализ ПЦР?

Забор материала для исследования на наличие хламидий делают с помощью специальных пластиковых зондов (гинекологических щеток) и помещают в пробирку конической формы объемом 1,5 мл с транспортной средой с муколитиком розового цвета. Она стерильна и предназначена для одноразового использования. Соскоб можно брать из уретры или шейки матки, не допуская повреждения слизистой и появления примеси крови в мазке.

Метод амплификации нуклеиновых кислот полимеразной цепной реакцией (ПЦР) считается одним из самых точных и быстрых способов диагностики инфекционных заболеваний. Так называют искусственный процесс многократного копирования или амплификации специфической последовательности ДНК, а это становится возможным благодаря использованию особого фермента – ДНК-полимеразы. Основной принцип анализа ПЦР на хламидии состоит в том, что реакция полимеризации или синтеза полимерной цепи ДНК происходит после внедрения специального праймера (короткий фрагмент ДНК) в каждом цикле. Их смена вызывается изменением температуры.


Чувствительность анализа ПЦР считают более высокой, чем у любой другой (тоже высокоточной) методики диагностики – иммунофлюоресцентного анализа крови или ИФА, так как его показатели иногда снижаются из-за субъективности оценки результатов, недостаточной чувствительности для обнаружения антигенов в очень малом количестве. Расшифровку анализа стоит доверять только врачу.

Проведение исследования включает в себя три стадии:

  1. При температуре 94°С происходит изменение белковой молекулы двойной цепи исследуемой ДНК и она превращается в одноцепочную (стадия денатурации).
  2. С определенными участками цепей исследуемой ДНК связываются искусственно синтезированные короткие фрагменты ДНК (отжиг).
  3. При 70-72°С проводят синтез новых цепей ДНК (полимеризация).

Во время проведения исследования на наличие хламидий лаборант удваивает каждую из двух антипараллельных цепей ДНК. Точность анализа ПЦР очень высока – до 1 копии геномной ДНК возбудителя болезни в исследуемой пробе, результат ИФА в процентном соотношении чуть ниже. Перекрестных реакций с похожими по структуре микроорганизмами быть не может, что обеспечивает высокую точность исследования. На сегодня процесс проведения анализа автоматизирован, и поэтому точный результат можно получить в течение дня при наличии одного набора оборудования и незначительно отличающихся по структуре наборов реактивов.


Совет: любые результаты анализов должны интерпретироваться в соответствии с клиническими данными, поэтому объективную расшифровку может дать только врач. Важно знать, что отрицательный результат не исключает хламидийной инфекции, а получение положительного результата указывает на текущее наличие инфекции.

Подготовка к сдаче анализа

Для ПЦР-диагностики хламидиоза у женщин и мужчин используются специальные тест-системы разных производителей, например, Изоген, Литех, Амплисенс. Расшифровку можно увидеть в результатах анализа с указанием аналитической чувствительности тест-системы. Сдавать мазок на хламидиоз целесообразно только при условии исполнения некоторых условий (от этого напрямую зависит точность исследования):

  • в течение 3 часов воздержаться от мочеиспускания;
  • 72 часа перед процедурой нужно придерживаться некоторых ограничений – не пить алкоголь, исключить половые контакты, спринцевание, использование вагинальных свечей, мазей;
  • 14 дней перед сдачей мазка не принимать антибактериальные препараты.

Для правильного и своевременного лечения заболеваний необходимо вовремя установить диагноз, и практически всегда сделать это без лабораторных исследований невозможно. Сдача анализа ПЦР (альтернатива – ИФА) позволяет быстро и максимально точно провести раннюю диагностику инфекционных заболеваний, контроль лечения, уточнить сомнительные результаты серологических исследований, выявить наиболее патогенные штаммы инфекционных агентов и, в частности, своевременно определить хламидии в организме мужчины или женщины. Объективную расшифровку лабораторного исследования может предоставить только лечащий врач.

Видео

parazit03.com

Общие сведения

Хламидиоз относится к венерическим заболеваниям, которые передаются половым путем и представляют немалую опасность для здоровья человека. Причиной хламидиоза считают внутриклеточных микроорганизмов – хламидий.

Заболевание встречается не только у людей, но и у животных. Например, у кошек, больных на хламидиоз, происходит формирование проблем с глазами, пищеварительным трактом и легкими. Для уточнения диагноза рекомендуется провести сдачу анализа для исследования методом ИФА или ПЦР.

В наше время среди мужчин и женщин чаще всего выявляют генитальную форму болезни. Хламидии обладают способностью повреждать эпителий половых органов, что приводит к формированию осложнений в виде заболеваний мочеполовой системы.

Достаточно часто инфекционный процесс приводит к появлению:

  • воспаления уретры;
  • эндоцервицита;
  • артрита;
  • бесплодия;
  • патологических процессов во время вынашивания ребенка.

Пцр хламидии что это

Если возбудитель заболевания атакует мужчин, то у них может развиваться:

  • простатит;
  • цистит;
  • атрофия предстательной железы;
  • эпидидимит;
  • проктит.

Лечение хламидиоза должно проводиться только традиционными методами с применением антибактериальных препаратов, в противном случае эффекта наблюдаться не будет.

Что касается выявления заболевания у мужчин и женщин, то оно проводится:

  • культурной методикой – осуществляется забор биологического материала на питательные среды;
  • молекулярно-биологической методикой – ПЦР;
  • взятием мазков на цитологическое обследование;
  • серологическим исследованием или ИФА – данный способ позволяет осуществить определение наличия в сыворотке крови человека антител к возбудителю заболевания.

Теперь рассмотрим метод ПЦР-диагностики более детально.

Техника забора материала для анализа ПЦР

Диагностика хламидиоза считается задачей не из легких, ведь присутствие возбудителя невозможно обнаружить при обычном осмотре или при проведении исследования мазка на микрофлору.

Пцр хламидии что это

У женщин мазок на хламидии методом ПЦР берут из влагалища, для этого используют специально предназначенные пластиковые зонды. После взятия материала их помещают в пробирку, содержащую транспортную среду (муколитик розового цвета). Данная пробирка стерильная, использовать ее разрешается только один раз.

Обратите внимание, что при проведении забора материала необходимо быть достаточно осторожным и избегать травматизации слизистой оболочки, ведь присутствие примесей крови в материале для исследования недопустимо.

У мужчин проводят соскоб с урогенитального канала. Головку члена протирают физиологическим раствором, проводят массаж уретры и вводят зонд в мочеиспускательный канал на 1–2 см. После этого его помещают в стерильную пробирку, которая плотно закрывается.

Процесс исследования

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) относится к группе методов диагностики, которые отличаются скоростью и высоким уровнем достоверности.

Анализ на хламидии методом ПЦР считается чрезвычайно чувствительным по сравнению с другими методами диагностики, например с иммунофлюоресцентным анализом крови (ИФА), результаты которого довольно часто занижают через субъективность оценки результатов и недостаточный уровень чувствительности антигенов. Важным моментом считается то, что интерпретацию результатов должен проводить только квалифицированный специалист.

Процесс исследования состоит из:

  • денатурации – при температурных показателях 94 градуса происходит замена двойной цепи ДНК, которая трансформируется в одноцепочечную;
  • отжига;
  • полимеризации – данная стадия характеризуется проведением синтеза новых цепей ДНК.

Достоверность анализа ПЦР на хламидии находится на высоком уровне, что объясняется отсутствием перекрестных реакций с подобными по строению микроорганизмами.

Обратите внимание, что полученные результаты в обязательном порядке должны сопоставляться с общим состоянием человека, поэтому правильную оценку результата может осуществить лишь доктор.

Правила подготовки

Перед тем как сдавать мазок ПЦР на хламидии, необходимо ознакомиться с некоторыми правилами и рекомендациями. Их выполнение позволит получить верный результат.

Пцр хламидии что это

Важно! Забор материала не проводится у женщин во время менструального цикла. Объясняется это тем, что присутствие кровяных выделений на слизистой оболочке мешает осуществить забор материала.

Так как для проведения ПЦР-диагностики хламидиоза применяют специально предназначенные тест-системы, сдаваться мазок должен только при соблюдении определенных условий:

  • исследуемая личность должна воздержаться от мочеиспускания на протяжении трех часов до момента забора материала;
  • в течение трех дней до предстоящего обследования необходимо исключить из своего рациона алкоголь, воздерживаться от половых отношений, не проводить спринцеваний, не использовать вагинальных свечей и мазей;
  • на протяжении двух недель до момента обследования исследуемая личность не должна принимать никаких антибактериальных препаратов.

Проведение диагностики хламидиоза считается достаточно важным моментом, ведь только сдача анализа дает возможность осуществить своевременное адекватное лечение.

Пцр хламидии что это

Самым эффективным, точным и быстрым считается анализ на хламидии ПЦР. С его помощью проводится не только выявления инфекционных заболеваний, но и проведение контроля лечения. Тест может упростить или подтвердить результаты серологических исследований.

parazitycheloveka.ru

2. ПЦР на Chlamydia trachomatis

Суть метода ПЦР — обнаружение генетического материала (ДНК) в исследуемом образце и его достраивание путем добавления «строительного» материала (дезоксинуклеорибофосфатов). В результате цепь ДНК удлиняется, ее обнаружение становится возможным с помощью электрофореза и/или флюоресценции.

Все манипуляции выполняются в специальном приборе – амплификаторе, который самостоятельно контролирует смену температур и протекающих фаз соответственно числу необходимых циклов амплификации.

ПЦР позволяет обнаружить хламидии уже через 3 дня после заражения, при высоком риске исследование повторяют через 2 недели после предполагаемого инфицирования.

В настоящее время набирает большую популярность ПЦР-диагностика в режиме реального времени (у женщин этот тест называется Фемофлор). С его помощью исследуется и качественная, и количественная характеристика влагалищной микрофлоры.

ПЦР в режиме реального времени характеризуется короткими сроками выполнения, высокой специфичностью и чувствительностью (порядка 88-90%).

Но для подтверждения урогенитального хламидиоза ряд авторов рекомендуют использовать монокомпонентные наборы для ПЦР из-за более высокой их чувствительности (100%) в отношении хламидий трахоматис.

Совет этот актуален в ситуации, когда врач подозревает наличие хламидийной инфекции у пациентки, и исследование проводится для верификации диагноза. При отсутствии специфических симптомов у женщины более целесообразно проведение комплексной ПЦР (уровень обоснованности II).

3. Амплификация РНК хламидий (NASBA)

Это относительно новый для России, но более информативный молекулярно-биологический метод. Суть его заключается в обнаружении в материале (мазке, соскобе, моче и так далее) цепей РНК, наличие которых сопровождает процесс построения и жизнедеятельности клетки хламидии.

РНК является транспортировщиком генетической информации от ДНК и строителем клеточных структур возбудителя путем синтеза белка.

Именно по наличию РНК в положительных результатах NASBA можно судить об эффективности проводимой антибактериальной терапии: оценивается жизнеспособность хламидий. ПЦР, основанная на обнаружении только ДНК, такой возможности не имеет.

NASBA может применяться для контроля излеченности в более ранние сроки по сравнению с ПЦР. Для контроля эффективности лечения данный метод актуален по прошествии всего 14 дней после последнего приема антибиотиков.

4. Как правильно сдавать анализ на хламидии женщинам?

Женщины анализ на хламидии методами ПЦР или NASBA могут сдать у врача-гинеколога, дерматовенеролога.

Материалами для исследования у женщин обычно служат:

  • Соскоб из уретры, влагалища, цервикального канала вне менструации. Условием является наличие в забранном материале клеток эпителия. При взятии обычного мазка, слизистого отделяемого, гноя и тому подобного, результат может быть не информативным.

Соскоб на анализ у женщин берут из наружного отверстия уретры, цервикального канала и заднего свода влагалища.

  1. 1При использовании универсального зонда: после взятия материала рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующим раствором.
  2. 2При использовании ложечки Фолькмана: ее ополаскивают в пробирке с консервирующим раствором. После этого емкость плотно закрывают, а инструмент дезинфицируют и стерилизуют.
  • Первая порция свободно выпущенной мочи. Именно в первой порции мочи сосредоточено максимальное количество слущенных эпителиальных клеток урогенитального тракта. У женщин первая порция свободно выпущенной мочи менее информативна (чувствительность 80-90%), поэтому применяется намного реже, чем соскоб. При этом нет доказательств, что утренняя моча более диагностически значима, чем, например, дневная (уровень обоснованности II).

Моча собирается пациенткой самостоятельно в чистый стерильный сухой контейнер. Для исследования достаточно порядка 10 мл мочи. Рекомендуемый период хранения  — 24 часа при соблюдении необходимого уровня температур (+2С…+8С).

5. Особенности забора материала у мужчин

Мужчины сдать анализы на хламидии могут у врача-уролога, врача-дерматовенеролога, врача-репродуктолога, андролога.

Материалами для исследования у мужчин обычно служат:

  • Отделяемое из уретры, соскоб из уретры. Подготовка пациента: перед забором материала не мочиться 2-3 часа, при обильных выделениях — 15-30 минут. При наличии обильных патологических выделений (например, гноя) рекомендуется удалить их ватным тампоном.

Процедура взятия соскоба для мужчин достаточно неприятна, порой болезненна. Соскоб забирается универсальным зондом из наружного отверстия уретры. После забора рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующей жидкостью.

  • Первая порция свободно выпущенной мочи (чувствительность выше, чем у женщин — 85-95%).
  • По показаниям для анализа на хламидии у мужчин может забираться секрет предстательной железы (при бесплодии, простатите и др. заболеваниях). Подготовка включает половое воздержание в течение 2 дней. Секрет простаты берет квалифицированный специалист после массажа предстательной железы.  Головку полового члена необходимо очистить стерильным ватным тампоном.

После завершения массажа выделившийся сок предстательной железы в количестве 0,5-1 мл собирают в сухую пробирку «Эппендорф» и плотно закрывают. При отсутствии секрета — собирают первую порцию мочи (в ней и будет содержаться весь секрет) по аналогии с обычной вышеописанной техникой.

Максимальный срок хранения всех вышеперечисленных материалов – 24 часа при строгом соблюдении температурного режима в диапазоне +2С…+8С.

Доставляется материал в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами. Для долгосрочного хранения взятый материал необходимо заморозить на срок не более 1 месяца при температуре -20С. Допускается только однократное размораживание материала.

6. Расшифровка результатов ПЦР и NASBA

  1. 1Как правило, результаты ПЦР и NASBA доступны уже через 24-36 часов, в частных лабораториях сроки готовности результатов удлинены.
  2. 2Результат может быть «положительный» (хламидии обнаружены, то есть у пациента хламидиоз) и «отрицательный» (хламидии не обнаружены, то есть у пациента мочеполового хламидиоза нет или получен ложноотрицательный результат).

При использовании методов амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) для грамотной интерпретации результатов необходимо соблюдать некоторые условия:

  1. 1Контрольное исследование для оценки эффективности терапии назначается не ранее, чем через 1-1,5 месяцев после окончания приема препаратов (для ПЦР), и не ранее, чем через 14 дней для NASBA. Метод ПЦР не подразумевает определение жизнеспособности обнаруженных микроорганизмов, поэтому необходимо выждать полный цикл смены эпителия.
  2. 2При сборе первой порции мочи после последнего акта мочеиспускания необходим перерыв не менее 3 часов. При обильных патологических выделениях из уретры мочу собирают через 15-20 минут после последнего акта мочеиспускания.
  3. 3Существует мнение, что изменения гормонального фона приводят к появлению в исследуемом материале ингибиторов амплификации (слизь, кровь, гной и другие компоненты). Данная ситуация наиболее актуальна в период беременности, у женщин.

Предлагалось множество способов устранения данной проблемы, но пока ни один из них не является общепризнанным:

  1. 1Ситуация с ингибиторами амплификации актуальна для небеременных женщин на 3 неделе после менструации.
  2. 2При заборе материала в первые дни после менструации есть вероятность ложноотрицательного результата за счет недостаточного накопления возбудителя в эпителии. Таким образом, оптимальный период для взятия соскоба – 4 неделя после менструации.
  3. 3Нет никакой необходимости в специальной подготовке пациентки (например, введения каких-либо препаратов, соблюдения определенной диеты) перед исследованием. На результат это не повлияет.
  4. 4Существует проблема так называемого конкурентного ингибирования. Подобная ситуация возникает при использовании лабораторией наборов для ПЦР-диагностики нескольких видов микроорганизмов. При значительном преобладании в образце какого-либо одного вида возбудителя последний может «замаскировать» наличие других видов микроорганизмов. Результат будет ложноотрицательный.
  5. 5При подозрении на ложноположительный результат возникает необходимость повторного исследования. Эта ситуация актуальна при бессимптомном течении инфекции с низкой бактериальной нагрузкой. В этом случае возможно исследование того же образца, либо забор нового, а также применение другого теста или даже метода исследования (класс рекомендаций В, уровень обоснованности II). При выявлении большого количества хламидий в исходном материале повторное исследование будет лишним и экономически необоснованным.

7. Иммуноферментный анализ

Согласно последним Федеральным рекомендациям, иммуноферментный анализ (ИФА) не применяется для диагностики неосложненного урогенитального хламидиоза (цервицитов, уретритов и др.). Такое «недоверие» обусловлено тем, что ИФА больше актуален для тяжелых, глубоких поражений хламидиями C. Trachomatis.

Метод ИФА основан на обнаружении в крови специфических антител, вырабатываемых в ответ на антигены хламидий. По сочетанию трех классов иммуноглобулинов в крови пациента можно судить о тяжести и длительности инфекционного процесса.

Как уже было сказано, данный метод при выявлении урогенитального хламидиоза имеет ряд недостатков:

  1. 1Не информативен в диагностике восходящей инфекции, цервицита и уретрита.
  2. 2Высокая частота перекрестных реакций.
  3. 3Высока частота ложноположительных реакций.
  4. 4Не подходит для контроля излеченности после проведенной антибактериальной терапии, так как неизвестно время существования в крови специфических антител;
  5. 5Позволяет диагностировать преимущественно глубокие поражения, например, врожденный хламидиоз у новорожденных (класс рекомендаций А, уровень обоснованности I).

Для проведения ИФА используется венозная кровь пациента, взятая натощак. В защиту данного метода можно отметить:

  1. 1Его более низкую стоимость, по сравнению с ПЦР.
  2. 2Удовлетворительная специфичность порядка 90%.
  3. 3Быстрота выполнения.
  4. 4Простота забора и хранения материала.

8. Выявление хламидий в культуре клеток (на среде McCoy)

Этот метод уникален тем, что позволяет оценить не только качество проведенной терапии, но и определить чувствительность хламидий к различным группам антибактериальных препаратов.

Суть метода состоит в заражении обработанной культуры клеток забранным материалом с последующим посевом на питательную среду и инкубированием в течение двух суток. Наличие хламидий в полученных клетках определяется методом ПЦР.

Для определения чувствительности к антибиотикам в обработанную культуру клеток вносят ростовую среду с содержанием определенного антибактериального средства и инкубируют в течение 5 суток.

Эффективность препарата определяют по отсутствию или замедлению роста в определенных группах. Наличие роста свидетельствует о резистентности к добавленному в  питательную среду антибиотику.

Недостатки этого метода диагностики — длительность (7 дней) и дороговизна, поэтому в клинической практике он используется в крайне редко. Обычно показанием для его назначения служит длительная неэффективная антибактериальная терапия.

9. Экспресс-методы

За рубежом в качестве рутинных, недорогих методов выявления хламидийной инфекции используются модифицированные серологические тесты.

9.1. Тест-система Chlamidia-antigen ELISA medac

Тест-система работает по принципу твердофазного ИФА-анализа. Готовая тест-система покрыта полученными путем генной инженерии, готовыми специфическими антителами. Данные антитела связаны со специальным ферментным комплексом.

При связывании антигенов с антителами ферменты высвобождаются, появляется желто-зеленое свечение, интенсивность которого и учитывает спектрофотометр.

В отличие от распространенного ИФА, где материалом для исследования служит кровь, при использовании данной тест-системы субстратом служат мазок или соскоб, взятые у женщины, мужчины. Чувствительность этого метода — около 65-70%, а специфичность 90-100%.

9.2. РИФ

В основе реакции иммунофлюоресценции (РИФ) лежит прямое связывание антигенов с мечеными антителами, дающими зеленое свечение. Хламидийные тельца подсвечиваются внутри клетки. Результат оценивается при люминисцентной микроскопии.

Чувствительность данного метода — около 50%, что связано с высокой частотой ложных результатов. Это обусловлено и субъективным восприятием результата (исследование проводит лаборант), и высокой вероятностью перекрестных реакций, и нарушением техники забора биологического материала. С помощью данного метода невозможно оценить эффективность проведенного лечения.

На фоне всех недостатков главными плюсами РИФ остаются низкая стоимость, простота выполнения и короткие сроки получения результата. Именно поэтому РИФ еще используют в некоторых странах в качестве рутинного исследования на мочеполовой хламидиоз.

sterilno.net


Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

*